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液相色譜儀使用緩沖鹽的注意事項

2021-01-16 08:58:13來源:admin
液相色譜儀分析過程中常常需要使用緩沖鹽來調節流動相的pH 值,緩沖鹽的不當使用對色譜柱可能造成柱壓升高、柱效下降以及使化合物的保留時間發生變化等影響,所以液相色譜儀使用緩沖鹽應注意以下事項
1、避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對鋼質有腐蝕作用。
2、緩沖液最好要現配現用,往往緩沖液是良好的菌類培養液,隔天或放置長時間實驗時會有很多怪現象發生。
3、實驗后不可用有機溶劑直接過度,有機溶劑會處使鹽類析出,造成液路或色譜柱堵塞,可用95:5的水甲醇沖洗。
4、使用緩沖液要及時掌握pH范圍,做到胸中有數。
5、清洗液路和柱子時,有溫控可加熱到30℃易于沖洗。
6、長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出,若有白色鹽類析出,可考慮一定周期用10%硝酸沖洗一下液路(拆下柱子,走30ml,再用5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞。
7、選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。
如果流動相中有機溶劑的比例很高是不能用來沖洗緩沖鹽的,是洗不出來的。通常C18柱先用5%~10%的甲醇沖洗,是可以把緩沖鹽沖洗出來的,然后用純的有機溶劑來保護柱子。最好的方法是使用與流動相相同濃度不含鹽的流動相進行清洗。但就是速度慢一些。用水是為了快速替換,一般在15分鐘以內最好,且用0.8的流速較好。如果用純水沖,容易造成鍵合的碳鏈的流失,最好用5%~10%甲醇水溶液沖。可以用純水代替流動相中的緩沖液,有機相不變。這樣沖洗柱子比較穩妥。

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